ИЗ №2467744

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ

(19)

(11)

(13)

(51) МПК
A61K 31/15 (2006.01) A61K 31/455 (2006.01) C07D 213/79 (2006.01) A61P 9/12 (2006.01)

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

Статус:	не действует (последнее изменение статуса: 09.02.2024)
Пошлина:	учтена за 9 год с 09.08.2019 по 08.08.2020. Возможность восстановления: нет.

(21)(22) Заявка: 2011133264/15, 08.08.2011

(24) Дата начала отсчета срока действия патента:
08.08.2011

Приоритет(ы):

(22) Дата подачи заявки: 08.08.2011

(45) Опубликовано: 27.11.2012 Бюл. № 33

(56) Список документов, цитированных в отчете о поиске: RU 2417081 С1, 27.04.2010. RU 2262337 С1, 20.10.2005. RU 2381797 С1, 20.02.2011. RU 2233660 С1, 10.08.2004. ЕР 2067474 А1, 10.06.2009. US 7223797 А, 29.05.2007.

Адрес для переписки:
308015, г.Белгород, ул. Победы, 85, БелГУ, отдел интеллектуальной собственности, Н.Д. Цуриковой

(72) Автор(ы):
Даниленко Людмила Михайловна (RU),
Харитонова Ольга Владимировна (RU),
Сернов Лев Николаевич (RU),
Скачилова София Яковлевна (RU),
Кесарев Олег Георгиевич (RU),
Сернова Александра Львовна (RU),
Кесарева Зинаида Александровна (RU),
Покровский Михаил Владимирович (RU),
Новиков Олег Олегович (RU),
Покровская Татьяна Григорьевна (RU),
Жилякова Елена Теодоровна (RU),
Кочкаров Владимир Исхакович (RU),
Новикова Марина Юрьевна (RU),
Коваленко Борис Степанович (RU),
Голивец Татьяна Павловна (RU),
Молчанова Ольга Викторовна (RU),
Клочкова Галина Николаевна (RU),
Буравлева Светлана Викторовна (RU),
Фадеева Дарья Александровна (RU),
Татаренкова Ирина Александровна (RU)

(73) Патентообладатель(и):
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (RU)

(54) ПРОИЗВОДНОЕ 3-(2,2,2-ТРИМЕТИЛГИДРАЗИНИЙ) ПРОПИОНАТА - 5-ГИДРОКИСИНИКОТИНАТ 3-(2,2,2-ТРИМЕТИЛГИДРАЗИНИЙ) ПРОПИОНАТ КАЛИЯ, ОБЛАДАЮЩЕЕ ЭНДОТЕЛИОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

(57) Реферат:

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины, конкретно к новому химическому соединению - производному 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата, а именно 5-гидрокисиникотинат 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионату калия, обладающему повышенной эндотелиопротекторной активностью, которое может найти применение в медицине в комплексном лечении для коррекции эндотелиальной дисфункции при сердечно-сосудистых заболеваниях. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к новым химическим соединениям - 5-гидрокисиникотинат 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионат калия, обладающим эндотелиопротекторной активностью.

Известна фармацевтическая композиция, содержащая 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионат, Д-глюкуроновую кислоту, изотонический раствор для стимуляции гемопоэза (RU №2033152, публ. 20.04.1995).

Известна комбинация, в состав которой входят пероральные сахароснижающие препараты, ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента (АПФ), антиоксиданты и 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионат, позволяющая снижать выраженность симптомов периневральной ишемии (RU №2402325, публ. 27.10.2010).

Предложенные фармацевтические композиции, представляют собой комбинацию, включающую два или несколько соединений с 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионатом, действующих однонаправленно, для повышения эффективности при лечении заболевания сердечно-сосудистой системы. Но использование нескольких компонентов в лечении увеличивает возможность проявления побочных эффектов отдельно взятого препарата, неудобство использования для больного и вероятность возникновения непредсказуемого эффекта при взаимодействии.

Известно использование фармацевтических композиций, содержащих 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата дигидрат (милдронат) и соль и/или соли янтарной кислоты, в твердой и/или жидкой форме, в качестве противоишемического, антигипоксического, антиоксидантного средства при использовании в острой и подострой стадии различных гипоксических состояний, в частности у больных с острым инфарктом миокарда и сердечной недостаточностью (RU №2005125660, публ. 20.02.2007).

Известна эндотелиопротективная эффективность самого 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата (милдроната) (М.В.Корокина и Е.В.Артюшкова с соавторами («Эндотелиопротекторные свойства эналаприла и милдроната» Научные ведомости БелГУ. Серия Медицина. Фармация 2011, №4 с.57-61, «Эндотелио- и кардиопротективные эффекты цитопротектора метаболического действия мельдония при экспериментальном моделировании дефицита оксида азота» сб. тр. межвуз. науч. конф., посвящ. памяти проф. Владислава Васильевича Пичугина и 75-летию КГМУ, Курск 2009 г, с.95-97).

При экспериментальном моделировании артериальной гипертензии у животных увеличение реактивных форм кислорода приводит к эндотелиальной дисфункции, что подтверждается улучшением эндотелиозависимой релаксации при введении антиоксидантов. В настоящее время для коррекции эндотелиальной дисфункции перспективными считаются препараты, обладающие антиоксидантными свойствами, так как главным механизмом, лежащим в основе эндотелиальной дисфункции, является снижение продукции и биодоступности NO при одновременном повышении супероксид аниона, который обладает способностью тормозить экспрессию и активность эндотелиальной NO-синтазы (eNOS), а также связывать и инактивировать NO, уменьшать его содержание в клетке. Сдвиг физиологического равновесия между NO и О² ведет к образованию высокотоксичного пироксинитрита (ONOO^-), 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионат (милдронат) сам антиоксидантными свойствами не обладает, но повышает в организме концентрацию гамма-бутиробетаина (ГББ), так как под влиянием милдроната он медленнее окисляется до карнитина. В свою очередь, ГББ способен индуцировать образование оксида азота (NO), который действует как один из наиболее активных природных агентов, связывающих свободные радикалы в организме. Механизм эндотелиопротекторного действия милдроната является опосредованным, т.е. увеличивая количество, ГББ способен защищать клетки от эффектов свободных радикалов, но это осуществляется через индукцию биосинтеза NO.

Принимая в расчет важность изменения антиоксидантного статуса как одного из важнейших путей реализации повышения эндотелиопротекторной активности милдроната, необходимо повышение его антиоксидантного действия, способствующего увеличению эндотелиопротекторных свойств.

Задачей изобретения является создание нового производного 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата, обладающего более выраженной эндотелиопротекторной активностью.

Поставленная задача достигается тем, что создается новое производное 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата, полученное путем взаимодействием 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата с гидроокисью калия и 5-гидрокисиникотиновой кислотой в присутствии растворителя при нагревании.

обладающее эндотелиопротекторной активностью.

Модификация 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата - 5-гидрокисиникотинат 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата калия - является новым химическим соединением и проявляет наиболее ярко выраженное эндотелиопротекторное и антиоксидантное действия перед препаратом сравнения - милдронатом, за счет введения новой функциональной группы

(5-гидрокисиникотинат), что позволило усилить эндотелиопротекторное свойство нового химического соединения.

Известно, что введение функциональной группы 5-гидроксиникотината в молекулу позволяет проявлять наличие антидиабетических (Liepinsh E. et al.), гиполипидемических эффектов, а также антиоксидантной активности данной группы, которая реализуется путем нормализации содержания продуктов перекисного окисления липидов в эритроцитах (Смирнов Л.Д., Терехина и соавт., 1999), тем самым эта группа позволит обеспечить повышение эндотелиопротекторного эффекта и дать возможность более широкого использования нового производного для профилактики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний.

Предлагаемое новое производное в патентной и научно-технической литературе не описано.

Пример получения 5-гидрокисиникотинат 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата калия.

К раствору 1,46 г (0,024 моля) калия гидроокиси в 40 мл 2-пропанола при 30-32°С и перемешивании добавляют 3,5 г (0,024 моля) 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата и выдерживают 20-25 минут. В полученный раствор загружают 3,34 г (0,024 моля) 5-гидрокисиникотиновой кислоты, перемешивают 30 минут, охлаждают до 5-8°С, кристаллизуют. Образовавшийся осадок отделяют, промывают 2×5 мл охлажденного 2-пропанола, сушат, получают 8,1 г (выход 91,8%) мелкокристаллический гигроскопичный продукт, Т_разлож 220-222°С.

Найдено, %: С - 38,91; Н - 6,05; N - 11,29; C₁₂H₁₈N₃O₅K₁•2,5 H₂O;

Вычислено, %: С - 39,13; Н - 6,25; N - 11,41.

ИК-спектр, см^-1: 3476, 3416, 2960, 2892, 1584, 1484, 1396, 1312, 1156, 792 (хлорид натрия).

Фармакологические свойства заявленного соединения

Опыты проводят на белых крысах, самцах линии Wistar массой 250-300 г. L-NAME (N-нитро-L-аргинин метиловый эфир) вводится внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут. На 8 день от начала эксперимента под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика и компьютерной программы «Biopac Systems, Inc.». Функциональные пробы: эндотелийзависимая вазодилатация (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелийнезависимая вазодилатация (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропруссеида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг. При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при р<0,05.

Пример конкретного выполнения

Болюсное внутривенное введение АХ в течение 3-5 с приводило к резкому падению артериального давления, достигающего пика у интактных животных для систолического давления (САД) 84,3±4,4, для диастолического давления (ДАД) - 38,7±2,8, при этом в течение первых 2-3 с развивалась резкая брадикардия до 130-150 ударов в минуту. ЭНЗВ также характеризовалась снижением САД до 83,0±3,7, ДАД до 42,1±4,4 с последующим восстановлением. Блокада NO-синтазы с помощью длительного, ежедневного, в течение 7 суток внутрибрюшинного введения L-NAME (в дозе 25 мг/кг) вызывала артериальную гипертензию (САД - 190,3±6,7, ДАД - 145,0±3,9 мм рт.ст.) и приводила к меньшему снижению показателей АД после введения АХ (САД до 110,6±5,2, ДАД до 82,8±6,6 мм рт.ст.) и НП (САД до 88,7±4,7, ДАД до 50,8±4,2 мм рт.ст.) по сравнению с интактными животными.

Одновременное введение L-NAME и 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата приводило к следующим показателям АД (САД - 181,8±9,3, ДАД - 128,8±6,0 мм рт.ст.), а в экспериментах с 5-гидрокисиникотинат 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионат калия (в дозе 199,1 мг/кг внутрибрюшинно) не приводило к снижению показателей исходных значений АД (САД - 183,1±3,8, ДАД - 125,1±4,5 мм рт.ст.), следовательно, и милдронат, и исследуемое производное не оказывали статистически значимого влияния на САД и ДАД и не предотвращали развитие выраженной гипертензии в экспериментах. Дозу производного рассчитывали по формуле:

где Д₁ - доза исследуемого производного 5-гидрокисиникотинат 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионат калия;

Д₂ - доза для препарата сравнения - милдронат;

M₁ - молекулярная масса 5-гидрокисиникотинат 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионат калия;

М₂ - молекулярная масса 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионат (милдроната);

При выборе дозы милдроната исходили из минимальной терапевтической дозы препарата с использованием коэффициента пересчета доз для животных, в данном случае для крыс (Freireich et al., 1966, Уланова И.П. и др. 1968).

Принципиальная разница в ЭЗВ и ЭНЗВ у интактных животных и животных с введением ингибитора NO-синтазы L-NAME закономерно привела к необходимости выведения специального показателя, характеризующего степень эндотелиальной дисфункции, являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления артериального давления (АД) в ответ на введение НП (эндотелийнезависимая вазодилатация) к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение АХ (эндотелийзависимая вазодилатация).

Рассчитывали это отношение у каждого животного интактной группы и крыс после моделирования блокады NO-синтазы и получили разницу данного показателя в 5 раз - соответственно 1,1±0,1 у интактных и 5,4±0,6 у животных, получавших L-NAME.

Таким образом, для дальнейшей оценки влияния АХ и НП при ЭЗВ и ЭНЗВ использовано это отношение как показатель коррекции эндотелиальной дисфункции. Так, в группе, где на фоне введения ингибитора NO-синтазы L-NAME вводился милдронат, это отношение соответствовало значению 2,9±0,4, а в группе с введением 5-гидрокисиникотинат 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионат калия - 2,3±0,2 (таблица 1). Что говорит о наиболее выраженном эндотелиопротекторном эффекте исследуемого производного.

Результаты влияния 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата и 5-гидрокисиникотинат 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионат калия на коэффициент эндотелиальной дисфункции при моделировании L-NAME-индуцированного (25 мг/кг внутрибрюшинно, однократно в течение 7 дней) дефицита оксида азота приведены в таблице 1.

Таблица 1.

Группы животных Функциональная проба САД, мм рт.ст. ДАД, мм рт.ст. S сосудистой реакции при проведении ЭЗВД с АХ и ЭНВД с НП, в ус. ед. КЭД, ус. ед.

Интактные Исходное 137,7±3,7 101,9±4,3

АХ 84,3±4,4 38,7±2,8 1268,0±74,8 1,1±0,1

НП 83,0±3,7 42,1±4,4 1375,3±93,7

Получавшие L-NAME (25 мг/кг) Исходное 190,3±6,7^∗ 145,0±3,9^∗

АХ 110,6±5,2^∗ 82,8±6,6^∗ 695,3±87,6^∗ 5,4±0,6^∗

НП 88,7±4,7 50,8±4,2 3322,7±116,7^∗

L-NAME (25 мг/кг) + милдронат (90 мг/кг) Исходное 181,8±9,3^∗∗ 128,8±6,0^∗∗ 2,9±0,4^∗∗

АХ 84,6±3,6 52,2±2,7 823,96±111,4^∗∗

НП 93.2±4,9 57,6±6,1 2389,5±179,6^∗∗

L-NAME (25 мг/кг)+5-гидрокисини котинат 3-(2,2,2-триметилгид разиний) пропионата калия (199,1 мг/кг) Исходное 183,1±3,8^∗∗ 125,1±4,5^∗∗

АХ 91,5±3,4 64,5±2,6 821,0±99,2^∗∗ 2,3±0,2^∗∗

НП 104,7±6,5 63,0±6,7 1888,3±177,2^∗∗

Примечание: ^∗ -- р<0,05 в сравнении с интактной группой, ^∗∗ - р<0,05 в сравнении с L-NAME, САД - систолическое артериальное давление, ДАД - диастолическое артериальное давление, S - площадь над кривой восстановления артериального давления при проведении функциональных проб, КЭД - коэффициент эндотелиальной дисфункции.

Таким образом, полученные результаты позволяют констатировать активизацию коррекции эндотелиальной дисфункции на фоне введения L-NAME, 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионатом и его производным 5-гидрокисиникотинат 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата калия, но эндотелиопротекторный эффект производного 5-гидрокисиникотинат 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата калия выше по сравнению с препаратом сравнения милдронат за счет введения новой функциональной группы. Указанные свойства предлагаемого производного могут найти применение в медицине в комплексном лечении для коррекции эндотелиальной дисфункции при сердечно-сосудистых заболеваниях.

Формула изобретения

Производное 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата - 5-гидрокисиникотинат 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионат калия, (CH3)3N⁺NHCH2CH2COOKRCOO^-,
где , обладающее эндотелиопротекторной активностью.

ИЗВЕЩЕНИЯ

MM4A Досрочное прекращение действия патента из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 09.08.2015

Дата публикации: 10.04.2016

NF4A Восстановление действия патента

Дата, с которой действие патента восстановлено: 27.03.2017

Дата внесения записи в Государственный реестр: 27.03.2017

Дата публикации: 27.03.2017

PD4A Изменение наименования, фамилии, имени, отчества патентообладателя

(73) Патентообладатель(и):
федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» (НИУ «БелГУ») (RU)

Дата внесения записи в Государственный реестр: 10.04.2017

Дата публикации: 10.04.2017

QB4A Государственная регистрация договора о распоряжении исключительным правом

Дата и номер государственной регистрации предоставления права использования по договору: 01.02.2018 РД0242909

Лицо(а), предоставляющее(ие) право использования: федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (RU)

Лицо, которому предоставлено право использования: Открытое акционерное общество Управляющая компания "Белфарма" (RU)

Вид договора: лицензионный

Условия договора: неисключительная лицензия на срок действия патента на территории РФ.

Дата внесения записи в Государственный реестр: 01.02.2018

Дата публикации и номер бюллетеня: 01.02.2018 Бюл. №4

QB4A Государственная регистрация предоставления права использования по договору

Дата и номер государственной регистрации предоставления права использования по договору: 05.06.2019 РД0297500

Лицо, которому предоставлено право использования: Общество с ограниченной ответственностью "Научный Центр Белфарма" (RU)

Вид договора: лицензионный

Условия договора: неисключительная лицензия сроком на 5 лет на территории РФ.

Дата внесения записи в Государственный реестр: 05.06.2019

Дата публикации и номер бюллетеня: 05.06.2019 Бюл. №16

QB4A Государственная регистрация предоставления права использования по договору

Дата и номер государственной регистрации предоставления права использования по договору: 19.06.2019 РД0298233

Лицо(а), предоставляющее(ие) право использования: Общество с ограниченной ответственностью "Научный Центр Белфарма" (RU)

Лицо, которому предоставлено право использования: Общество с ограниченной ответственностью "РУСХИМБИО" (RU)

Вид договора: сублицензионный

Условия договора: неисключительная сублицензия на срок до 05.06.2024 на территории РФ.

Дата внесения записи в Государственный реестр: 19.06.2019

Дата публикации и номер бюллетеня: 19.06.2019 Бюл. №17

Дата прекращения действия патента: 09.08.2020

Дата внесения записи в Государственный реестр: 20.05.2021

Дата публикации и номер бюллетеня: 20.05.2021 Бюл. №14

Таблица 1.
Группы животных	Функциональная проба	САД, мм рт.ст.	ДАД, мм рт.ст.	S сосудистой реакции при проведении ЭЗВД с АХ и ЭНВД с НП, в ус. ед.	КЭД, ус. ед.
Интактные	Исходное	137,7±3,7	101,9±4,3
	АХ	84,3±4,4	38,7±2,8	1268,0±74,8	1,1±0,1
	НП	83,0±3,7	42,1±4,4	1375,3±93,7
Получавшие L-NAME (25 мг/кг)	Исходное	190,3±6,7^∗	145,0±3,9^∗
	АХ	110,6±5,2^∗	82,8±6,6^∗	695,3±87,6^∗	5,4±0,6^∗
	НП	88,7±4,7	50,8±4,2	3322,7±116,7^∗
L-NAME (25 мг/кг) + милдронат (90 мг/кг)	Исходное	181,8±9,3^∗∗	128,8±6,0^∗∗		2,9±0,4^∗∗
	АХ	84,6±3,6	52,2±2,7	823,96±111,4^∗∗
	НП	93.2±4,9	57,6±6,1	2389,5±179,6^∗∗
L-NAME (25 мг/кг)+5-гидрокисини котинат 3-(2,2,2-триметилгид разиний) пропионата калия (199,1 мг/кг)	Исходное	183,1±3,8^∗∗	125,1±4,5^∗∗
	АХ	91,5±3,4	64,5±2,6	821,0±99,2^∗∗	2,3±0,2^∗∗
	НП	104,7±6,5	63,0±6,7	1888,3±177,2^∗∗
Примечание: ^∗ -- р<0,05 в сравнении с интактной группой, ^∗∗ - р<0,05 в сравнении с L-NAME, САД - систолическое артериальное давление, ДАД - диастолическое артериальное давление, S - площадь над кривой восстановления артериального давления при проведении функциональных проб, КЭД - коэффициент эндотелиальной дисфункции.